Unidade VI - Regulação da expressão gênica em eucariotos
4. Regulação transcricional
O mecanismo de regulação em eucariotos está basicamente sob um controle positivo. Isso porque, se os genes estivessem sob um controle negativo, haveria necessidade da síntese de aproximadamente 100 mil repressores para se ligarem aos operadores gênicos e impedirem a transcrição das cerca de 100 mil proteínas, que seria o número estimado de proteínas anteriormente à conclusão do Projeto Genoma Humano. Considerando um controle positivo, as proteínas regulatórias podem se ligar aos sítios reguladores, estimular a transcrição e se desligar ligando-se em outro local.
Além dos eventos necessários à transcrição de um gene descritos na Unidade III, importante aqui é a observação de que existem nesse mecanismo regulatório os elementos de atuação em “cis” e os elementos regulatórios de ação em “trans”. Os elementos regulatórios em “cis” são aqueles que desempenham funções regulatórias da expressão gênica no mesmo cromossomo da sequência de um gene que irá ser transcrito, como as regiões promotoras dos genes, seus elementos proximais e os distais, destacando-se os reforçadores ou enhancers. Os silenciadores também são sequências em “cis” localizadas na molécula de DNA, cuja função é reduzir ou reprimir as taxas de transcrição de um gene. Os elementos em “trans” são aqueles que desempenham funções regulatórias a distância da sequência pela qual foram codificados, atuando normalmente em cromossomos diferentes dos quais foram produzidos. Os transativadores correspondem às proteínas produzidas por RNA expressos de cromossomos diferentes daqueles em que irão regular, por isso a denominação “trans”. Dentro dessa classe estão as proteínas que atuam como fatores de transcrição (TFs), que são capazes de recrutar outras proteínas, como os coativadores, visto que a afinidade da RNA polimerase ao promotor é baixa, havendo a necessidade de ligação das proteínas regulatórias para aumentar a afinidade da RNA polimerase ao promotor e iniciar a transcrição. Para regular os níveis de transcrição em eucariotos, o modelo é complexo envolvendo a regulação gênica por cascata protéica dada pelos fatores gerais de transcrição (GTFs), como visto na Unidade III.
Em síntese, os enhancers funcionam como intensificadores, promovendo a transcrição de modo mais eficiente, e os silenciadores, que são as regiões onde proteínas repressoras se ligam inibindo a transcrição dos genes correspondentes. Nos acentuadores se ligam as proteínas coativadoras, que estimulam a transcrição dos genes correspondentes, sendo alvo de fatores específicos. Os acentuadores podem estar localizados acima do gene (upstream), abaixo do gene (downstream), ou mesmo dentro do gene. Frequentemente, os enhancers levam a uma curvatura do DNA devido a interações com as proteínas ligadas à região promotora. Em leveduras, esses elementos estimuladores de transcrição foram descritos como UAS (upstream activating sequences). Essas sequências estão cerca de 100 bases acima do início da transcrição e são equivalentes aos acentuadores dos eucariotos mais complexos .
O balanço entre a ligação de ativadores e de repressores aos enhancers e aos silenciadores, respectivamente, auxilia no controle das taxas de transcrição dos genes de eucariotos. O que realmente faz com que o gene seja transcrito é a combinação única e particular do promotor e de fatores de transcrição.
Os hormônios e seus fatores de transcrição representam uma classe de reguladores da expressão gênica em “trans” de ligação a sequências denominadas elementos de resposta a hormônio (HRE) (cis), que correspondem aos sítios de ligação no DNA dos receptores proteicos de ligação a hormônios. As proteínas receptoras de hormônio se localizam no citoplasma, mas atuam no núcleo da célula, possuindo domínio de ligação a ligante e domínio de ligação ao DNA, levando à transcrição de genes de resposta a hormônios. Dentre os exemplos dessa classe estão as proteínas receptoras de andrógeno (AR). Essa proteína pertence à família dos receptores nucleares e possui dois domínios dedos de zinco de ligação ao DNA. No citoplasma está na sua forma inativa associada às chaperonas que impedem a sua degradação. Quando a testosterona entra na célula, no citoplasma é convertida em DHT (dihidrotestosterona) pela ação da enzima 5-alfa-redutase, e a DHT se liga ao domínio de ligação a ligante do receptor de andrógeno. O AR complexado à DHT passa para o núcleo e na forma de homodímero levam à transcrição dos genes regulados por hormônio pela ligação ao ARE (elemento de resposta a andrógeno) .
